多克隆抗體和單克隆抗體的關鍵差異及各自的優缺點。

小結

多克隆抗體

特點：

• 識別任一抗原上的多個表位。所得血清為異質性抗體混合物，其親和力各有不同。

• 多克隆抗體主要由 IgG 亞類組成。

• 通常使用多肽免疫原制備以獨有表位為靶標的多克隆抗體，尤其是針對高同源性的蛋白家族。
  
  

抗體制備：

• 制備成本低廉且制備速度較快。

• 制備過程比單克隆抗體簡單。

優點：

多克隆抗體可識別任一抗原上的多個表位，因此具有以下優點:

• 高親和性：由于靶蛋白上的多個表位能夠結合不止一個抗體分子，多克隆抗體可放大低表達水平靶蛋白的信號。但是，這會影響定量實驗（如流式細胞術實驗）結果的準確性。

• 可識別多個表位，有利于免疫沉淀 (IP) 和染色質免疫沉淀 (ChIP) 實驗獲得更好的結果。

• 與單克隆抗體相比，對微小抗原變化（例如多態性、糖基化異質性或者輕微變性）的包容性更強。

• 可識別與免疫原蛋白質具有高度同源性的蛋白質，還可用于篩查非免疫原物種的靶蛋白。

• 通常是檢測變性蛋白質的首選。

• 多表位通?？商嵘龣z測的穩定性。

缺點：

• 易產生批次間差異。

• 產生大量非特異性抗體，可能會在某些應用中產生背景信號。

• 由于具有多個表位，檢測免疫原序列的交叉反應性非常重要。

• 不適用于探測抗原的特定結構域，因為抗血清通常會識別多個結構域。

單克隆抗體

特點：

• 不易產生批次間差異。

• 僅由一種抗體亞型組成（例如 IgG1、IgG2、IgG3）。如需使用二抗進行檢測，應針對正確的亞類選擇抗體。
  
  

抗體制備：

• 技術要求較高。

• 應用技術之前需接受專門培訓。

• 需要花費較長時間制備雜交瘤細胞。

優點：

制得的雜交瘤細胞為持續且可再生產的單克隆抗體來源，而且所有批次均相同，有助于提升實驗過程和實驗結果的一致性和標準化水平。

單克隆抗體只檢測每個抗原上的一個表位，因此具有以下優點:

• 切片和細胞染色產生的背景信號更少。特異性地檢測一個靶表位，不易與其它蛋白質發生交叉反應。

• 由于具有高特異性，單克隆抗體非常適于用作實驗中的一抗，其產生的背景染色信號通常顯著低于多克隆抗體。

• 相較于多克隆抗體，單克隆抗體的同質性非常高。在相同的實驗條件下，單克隆抗體實驗之間的結果重現性非常高。

• 得益于其高特異性，單克隆抗體能夠在相關分子的混合物中（例如在親和純化過程中）極為高效地結合抗原。

缺點：

• 特異性過高，以致于無法進行跨物種的檢測。

• 與多克隆抗體相比，更易受化學處理造成的抗原表位丟失的影響。這可通過合并靶抗原相同的兩種或多種單克隆抗體進行補償（例如使用抗體組合試劑盒）。