抗體純化及濃縮試劑盒
發布時間:2022-07-14 10:47:49 點擊:748
利用我們的指南,選擇適合您抗體純化和濃縮需求的試劑盒
選擇合適的抗體純化和濃縮試劑盒
我們的流程圖使用簡便,可幫助您根據需求選擇最佳抗體純化或濃縮試劑盒。
選擇與我們的 Lightning-Link?、寡核苷酸和金屬偶聯試劑盒兼容的試劑盒 | 選擇與我們的納米顆粒偶聯試劑盒兼容的試劑盒 |
抗體純化試劑盒
許多市售抗體和自制抗體通常含有一些可能干擾抗體偶聯等應用的物質,這使得純化成為一個重要的考慮因素。我們的抗體純化試劑盒適用于血清、組織培養上清液(TCS)和腹水中抗體的純化。由此得到的純化抗體與我們的偶聯試劑盒完全兼容。
抗體通常儲存在含有抗體以外物質的緩沖液中。表 1 中突出顯示的抗體純化試劑盒旨在去除蛋白添加物,使抗體以適合的形式轉移到利于偶聯的緩沖液中。
表 1.
產品名 | 用途 | 偶聯試劑盒兼容性 |
適合多種屬 IgG 的純化 去除包括 BSA、甘氨酸、tris 和疊氮化物在內的污染物 純化天然樣本(如腹水或免疫血清)中的抗體 | Lightning-Link? 偶聯試劑盒 寡核苷酸偶聯試劑盒 | |
適合多種屬 IgG 的純化 去除包括 BSA、甘氨酸、tris 和疊氮化物在內的污染物 純化天然樣本(如腹水或免疫血清)中的抗體 | Lightning-Link? 偶聯試劑盒 寡核苷酸偶聯試劑盒 | |
僅適合純化小鼠 IgG 去除包括 BSA、甘氨酸、tris 和疊氮化物在內的污染物 純化天然樣本(如腹水或免疫血清)中的抗體 | Lightning-Link? 偶聯試劑盒 寡核苷酸偶聯試劑盒 | |
適合純化任何抗體亞型和種屬 去除 BSA、甘氨酸、tris 和疊氮化物 | Lightning-Link? 偶聯試劑盒 寡核苷酸偶聯試劑盒 | |
適合多種屬 IgG 的純化 去除包括 BSA、甘氨酸、tris 和疊氮化物在內的污染物 純化天然樣本(如腹水或免疫血清)中的抗體 | 納米顆粒偶聯試劑盒 | |
僅適合純化小鼠 IgG 去除包括 BSA、甘氨酸、tris 和疊氮化物在內的污染物 純化天然樣本(如腹水或免疫血清)中的抗體 | 納米顆粒偶聯試劑盒 | |
適合純化任何抗體亞型和種屬 去除 BSA、甘氨酸、tris 和疊氮化物 | 納米顆粒偶聯試劑盒 |
對于小鼠抗體純化試劑盒,這種方法需要在與蛋白 A 或 G 偶聯的瓊脂糖珠或者具有親和力和特異性的樹脂上捕獲抗體。利用磁珠或樹脂孵育抗體,然后通過簡單的洗滌程序去除不需要的物質。接著洗脫并中和純化抗體。這種方法不適用于含有大量稀釋抗體的樣本,例如組織培養上清液。
TCS 含有來自胎牛血清 (FBS) 的牛 IgG 分子,可以補充細胞生長培養基。這些分子會與抗體競爭接受標記,因此,進行偶聯反應前,需要去除這些分子。
表 2.
產品名 | 用途 | 偶聯試劑盒兼容性 |
適合純化多種屬 IgG,不適合純化山羊 IgG | Lightning-Link? 偶聯試劑盒 寡核苷酸偶聯試劑盒 | |
僅適合純化小鼠 IgG | Lightning-Link? 偶聯試劑盒 寡核苷酸偶聯試劑盒 | |
僅適合純化大鼠 IgG | Lightning-Link? 偶聯試劑盒 寡核苷酸偶聯試劑盒 | |
適合純化 IgG 片段 | 納米顆粒偶聯試劑盒 |
表 2 列出的純化試劑盒使用蛋白 A 或對與瓊脂糖珠偶聯的小鼠或大鼠 IgG 分子具有高親和力和特異性的樹脂。由于樹脂與牛 IgG 分子的結合強度很低,樹脂可以選擇性地捕獲抗體,而不會同時純化牛 IgG。
孵育后,將樹脂裝入純化柱,然后通過簡單的洗滌程序去除不需要的物質。接著洗脫并中和純化的抗體。
我們的抗體血清純化試劑盒(表 3)是通過將高度純化的蛋白 A 或 G 與瓊脂糖珠偶聯制備的,可用于從腹水或血清產生的抗體中純化出多種組分。
表 3.
產品名 | 用途 | 偶聯試劑盒兼容性 |
適合純化血清和腹水中的 IgG 片段 不適合純化山羊 IgG* | Lightning-Link? 偶聯試劑盒 寡核苷酸偶聯試劑盒 | |
適合純化血清和腹水中的 IgG 片段 | Lightning-Link? 偶聯試劑盒 寡核苷酸偶聯試劑盒 | |
純化天然樣本(如腹水或免疫血清)中的抗體 | 納米顆粒偶聯試劑盒 |
* 請查閱方案手冊,了解有關合適和不合適種屬抗體的更多信息。
在瓊脂糖珠上捕獲抗體,并與樹脂一起孵育。孵育期結束后,將樹脂裝入純化柱,然后通過簡單的洗滌程序去除不需要的物質。接著洗脫并中和純化的抗體。
磁珠抗體純化系統是基于蛋白 A 的抗體純化系統,配備獨特的洗脫和中和緩沖液,用于濃縮抗體。它還能夠純化少量抗體,回收率高。
抗體與蛋白 A 磁珠結合,隨后被磁力架捕獲,以純化抗體。
表 4.
產品名 | 用途 | 偶聯試劑盒兼容性 |
抗體濃縮 適合純化極少量抗體 | 兼容所有偶聯試劑盒 |
抗體濃縮和純化試劑盒
我們的抗體濃縮和純化試劑盒(表 5)可以使用離心柱簡單快速地濃縮抗體和蛋白。
表 5.
產品名 | 用途** | 偶聯試劑盒兼容性 |
適合濃縮抗體和蛋白 去除小分子添加物,例如疊氮化物、甘氨酸和 Tris | Lightning-Link? 偶聯試劑盒 寡核苷酸偶聯試劑盒 | |
適合濃縮抗體和蛋白 去除小分子添加物,例如鹽、檸檬酸鹽和疊氮化物 | 金標抗體和磁珠偶聯抗體 | |
適合濃縮抗體和蛋白 去除小分子添加物,例如鹽、檸檬酸鹽和疊氮化物 | Latex 和 Europium 偶聯試劑盒 |
** 需要注意的是,在此過程中,任何分子量大于 10 kDa 的緩沖液組分(例如 BSA)都會被濃縮。如果濃縮和重懸后,添加物的濃度不再適合偶聯,則應使用合適的純化試劑盒。
這些試劑盒還可以去除經過濾器過濾的抗體儲存液中的任何多余的低分子量添加物,例如 Tris、甘氨酸和疊氮化鈉,并捕獲抗體,隨后可以在有利于偶聯的緩沖液中回收抗體。疊氮化鈉會迅速降低 HRP 的酶活性,因此抗體與辣根過氧化物酶 (HRP) 偶聯時,去除疊氮化鈉尤為重要。